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Trabajos Finales de Graduación EMV - PCVET

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Examinando Trabajos Finales de Graduación EMV - PCVET por Materia "ADITIVOS"

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    Establecimiento e implementación de un protocolo de extracción, aislamiento, cultivo y reimplantación de células madre mesenquimales para el tratamiento de tendinitis y desmitis en equinos
    (Universidad Nacional, Costa Rica, 2007-06-14) Estrada Mc Dermott, Roberto; Estrada Umaña, Juan Manuel
    Como respuesta medica alas frecuentes recaídas que presentan los equinos al ser tratados por medio de las terapias tradicionales después de sufrir una lesión de tendón y ligamento que van de un 43% a 93% de los casos (Dahlgren, 2005; Crowe, 2004; Dyson, 2004; Kasashima et al., 2004; Ross & Dyson, 2003; Smith et al., 2003; Stashak, 2002; Becker et al., 1998; Gibson et al., 1997; Dyson, 1991 a, b; Gaughan et al., 1991); nace la necesidad de determinar si en el país es técnica y tecnológicamente factible realizar aislamientos de células madre de origen adiposo (ADSC) con fine~ terapeuticos en el país. El estudio se basa en la capacidad ( comprobada por medio de estudios in vivo) que este tipo de células presentan para regenerar el tejido tendinoso y producir una estructura biomecánicamente funcional. Además de esto las ADSC presentan un efecto antiinflamatorio significativo (Dahlgren, 2005; Nixon & Dahlgren, 2004; Smith et al., 2003; Young et al., 1998). La reparación normal en contraste, produce cicatriz no elástica, que a su vez favorece que se presenten recidivas en las lesiones una vez que el animal se somete a la carga completa de trabajo (Dyson, 2004; Hinchcliff et al., 2004; Ross & Dyson, 2003; Stashak, 2002). La presente tesis consiste en el establecimiento de un protocolo de aislamiento y cultivo de ASDC. Además la implementación de un protocolo de extracción de la muestra de tejido adiposo y reimplantación de las ADSC intralesionalmente en casos clínicos referidos a la Escuela de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional, Heredia, Costa Rica. Por otro lado se trato de identificar a las células aisladas por medio de sus características morfológicas, su comportamiento in vitro e in vivo, tinciones básicas e histoquímicas y su inmunofenotipo. Además se evaluó clínica y ultrasonográficamente los casos tratados para determinar su evolución. Mediante esta investigación se obtuvo un protocolo de aislamiento altamente especifico células morfológicamente muy similares alas ADSC y células madre mesenquimales (MSC) aisladas en otros trabajos, las cuales mantienen su morfología sin importar el medio de cultivo en el que estén, someterse a varios pasajes y congelación, que presentan características morfológicas similares a células primitivas o progenitoras, que son positivas a tinciones histoquímicas que comúnmente tiñen tejidos de origen mesenquimal, que no forman ningún tipo de masa en ratones inmunosupresos similar a lo reportado por Rubio et al., 2005 y que además han producido una mejoría clínica en los casas tratadas (Rubio et al., 2005; Strem et al., 2005; Gimble & Guilak, 2003; Zuk et al., 2002; Zuk et al., 2001). Todos estos hallazgos en conjunto permitieron determinar que las ASDC comparten características importantes con las células aisladas en este estudia, siendo indicativa de que a partir del protocolo que se ha planteada en esta investigación realmente se puede conseguir aislar y cultivar células madre mesenquimales de origen adiposo para fines terapéuticos, en este caso en especifico para tratar lesiones en tendón y ligamento.