Determination of streptomycin and doxycycline using LC/MS towards an effective treatment against an experimental Brucella abortus infection in mice

Abstract

Herein we described a versatile liquid chromatographic method for detection and quantification of the total levels of two antimicrobials [i.e., streptomycin (STM) and doxycycline (DOX)], in mice plasma and selected tissues, with the aid of a single quadrupole as a detection method. The method included a few sample preparation steps, including freeze-drying and in situ triphasic solvent-assisted defatting, precipitation, and extraction, allowing easy and fast tissue sample processing and avoiding analyte loss. Using a murine model, we demonstrated that mass spectrometry detects simultaneously and with high specificity two of the most widespread antimicrobials used against Brucellosis. An accurate [recoveries varied from 75.23 (bone marrow) to 101.33% (liver)] and sensitive (LoD in the ng g− 1 range) method to assess STM and DOX in murine tissue, including subtherapeutic and therapeutic doses of the antimicrobials, was achieved. This validated method can be successfully used to monitor the depletion of STM and DOX in several mice tissues and plasma during metabolism after administration.Aquí describimos un método versátil de cromatografía líquida para la detección y cuantificación de los niveles totales de dos antimicrobianos [es decir, la estreptomicina (STM) y la doxiciclina (DOX)] en el plasma de los ratones y en una selección de ellos. de dos antimicrobianos [es decir, estreptomicina (STM) y doxiciclina (DOX)], en el plasma de ratones y en tejidos tejidos seleccionados, con la ayuda de un cuadrupolo único como método de detección. El método incluía unos pocos pasos de preparación de la muestra pasos de preparación de la muestra, incluida la liofilización y el desengrasado, la precipitación y la extracción in situ asistidos por disolventes, permitiendo un procesamiento fácil y rápido de las muestras de tejido y evitando la pérdida de analitos. Utilizando un modelo murino, demostramos que la espectrometría de masas detecta simultáneamente y con alta especificidad dos de los antimicrobianos más extendidos antimicrobianos utilizados contra la brucelosis. Un método preciso [las recuperaciones variaron entre el 75,23 (médula ósea) y el 101,33% (hígado)] y sensible (LoD en el rango de ng g- 1) para evaluar STM y DOX en tejido murino, incluyendo se lograron dosis subterráneas y terapéuticas de los antimicrobianos. Este método validado se puede utilizar con éxito para controlar el agotamiento de STM y DOX en varios tejidos de ratones y en el plasma durante el metabolismo después de la administración.