Presencia de anticuerpos neutralizantes contra el virus de estomatitis vesicular (serotipos New Jersey e Indiana) en personas residentes en dos zonas lecheras de Costa Rica

Abstract

La primera parte de esta investigación tuvo como objetivo determinar la prevalencia de anticuerpos contra el virus de estomatitis vesicular, serotipos New Jersey e Indiana, en la población humana de las regiones lecheras de Poás y Tilarán, Costa Rica. Para este fin se realizó un censo a la población humana de 31 fincas lecheras en estas dos áreas de producción de leche, se tomaron muestras de sangre a la totalidad de los habitantes y trabajadores de dichas fincas y mediante ensayo de seroneutralización se determinó la presencia de anticuerpos contra los serotipos New Jersey (NJ) e Indiana (IN) del virus de estomatitis vesicular (VEV). En el área de Poás se determinó una seroprevalencia de 40.80% para VEV-NJ y 16.66% para VEV-IN, mientras que en la zona de Tilarán se determinó una prevalencia de 26.19% para VEV-NJ y 3.57% para VEV-IN. En las dos regiones se encontró que el grupo de trabajadores agrícolas (peones y trabajadores de ordeño) presentaban un mayor número de seropositivos al VEV-NJ que el grupo de familiares residentes (p0.01). En el área de Poás el VEV-IN también mostró mayor número de seropositivos (p 0.01) en el grupo de trabajadores agrícolas que en el de familiares. En las dos regiones se determinó además mayor número de seropositivos para los dos serotipos en el grupo que tenía contacto directo con ganado vacuno en comparación a aquellos que tenían contacto indirecto (p0.01).

La segunda parte de esta investigación consistió en comparar las pruebas diagnósticas inmunoensayo enzimático competitivo (ELISA-c) y seroneutralización (SN) para la detección de anticuerpos contra el VEV-NJ y VEV-IN analizando 255 sueros humanos procedentes de fincas lecheras de las regiones de Poás y Tilarán, Costa Rica. Para el VEV-NJ la prueba de SN detectó 95 sueros positivos (37%) y 160 sueros negativos (63%), mientras que la prueba de ELISA-c detectó 81 sueros positivos (32%) y 174 sueros negativos (68%). La prueba de ELISA-c mostró una sensibilidad de 79% y una especificidad del 96% asumiendo la SN como prueba de oro, además la prueba J de Youden determinó una concordancia de 0.75 entre ambas pruebas para el diagnóstico de anticuerpos contraVEV-NJ. Para el VEV-IN, la prueba de seroneutralización detectó 32 sueros positivos (13%) y 223 sueros negativos (87%), mientras que la prueba de ELISA-c detectó 56 sueros positivos (22%) y 199 sueros negativos (78%). El ELISA-c mostró una sensibilidad del 94% y una especificidad del 88% asumiendo la seroneutralización como prueba de oro y la J de Youden determinó una concordancia de 0.82 entre ambas pruebas para VEV-IN. Además, se estandarizó y utilizó un Western Blot (WB) para la confirmación de sueros con resultados incongruentes en las pruebas de ELISA-c y SN para VEV-NJ. El WB confirmó como positivos el 100% de los 15 sueros con resultados incongruentes en las pruebas de SN y ELISA-c (13 sueros positivos en SN y negativos en ELISA-c y 2 sueros negativos en SN y positivos en ELISA-c). Estos sueros mostraron anticuerpos contra las diferentes proteínas virales G, N, P, y M del VEV-NJ.

The first part of this research was aimed at determining the prevalence of antibodies against vesicular stomatitis virus, serotypes New Jersey and Indiana, in the human population of the dairy regions of Poás and Tilarán, Costa Rica. For this purpose, a census of the human population of 31 dairy farms in these two milk production areas was carried out, blood samples were taken from all the inhabitants and workers of these farms and the presence of antibodies against vesicular stomatitis virus (VSV) serotypes New Jersey (NJ) and Indiana (IN) was determined by seroneutralization assay. In the Poás area, a seroprevalence of 40.80% for VEV-NJ and 16.66% for VEV-IN was determined, while in the Tilarán area, a prevalence of 26.19% for VEV-NJ and 3.57% for VEV-IN was determined. In both regions, it was found that the group of agricultural workers (farmhands and milking workers) had a higher number of NDV-NJV seropositive individuals than the group of resident family members (p0.01). In the Poás area, the VEV-IN also showed a greater number of seropositives (p 0.01) in the group of agricultural workers than in the group of family members. In both regions, a greater number of seropositives for the two serotypes were also found in the group that had direct contact with cattle compared to those who had indirect contact (p 0.01).

The second part of this research consisted of comparing competitive enzyme-linked immunosorbent assay (c-ELISA) and serum neutralization (SN) diagnostic tests for the detection of antibodies against VEV-NJ and VEV-IN by analyzing 255 human sera from dairy farms in the regions of Poás and Tilarán, Costa Rica. For VEV-NJ, the SN test detected 95 positive sera (37%) and 160 negative sera (63%), while the c-ELISA detected 81 positive sera (32%) and 174 negative sera (68%). The ELISA-c test showed a sensitivity of 79% and a specificity of 96% assuming SN as the gold standard, and the Youden's J-test determined a concordance of 0.75 between both tests for the diagnosis of antibodies against NJ-VEV. For VEV-IN, the seroneutralization test detected 32 positive sera (13%) and 223 negative sera (87%), while the ELISA-c test detected 56 positive sera (22%) and 199 negative sera (78%). The c-ELISA showed a sensitivity of 94% and a specificity of 88% assuming seroneutralization as the gold standard and Youden's J determined a concordance of 0.82 between both tests for VEV-IN. In addition, a Western Blot (WB) was standardized and used for the confirmation of sera with inconsistent results in the ELISA-c and SN tests for VEV-NJ. The WB confirmed as positive 100% of the 15 sera with incongruent SN and c-ELISA results (13 sera positive in SN and negative in c-ELISA and 2 sera negative in SN and positive in c-ELISA). These sera showed antibodies against the different viral proteins G, N, P, and M of VEV-NJ.