Actividad tripanocida de compuestos purificados de plantas del género Hamelia en modelos experimentales in vitro y establecimiento de la infección crónica con Trypanosoma cruzi en un modelo in vivo

Abstract

American trypanosomiasis is a prevalent and potentially fatal disease caused by the protozoan Trypanosoma cruzi that represents a serious public health problem in 21 Latin American countries. The available treatments are inefficient and produce severe side effects, which is why there is a need to study new efficient therapies against this disease. In preliminary investigations, an antiparasitic activity of interest was observed in non-purified fractions from Hamelia sp plants, from this, in this work cell infection models were established in vitro and the trypanocidal effect of three compounds extracted from Hamelia sp. . For this, mammalian cell lines were infected with trypomastigotes and the IC50 concentration of three hydroalcoholic compounds (c1-c3) was evaluated by anti-amastigote cytotoxicity assays. Compound c3 was the most potent against amastigotes, and the one with the best selectivity with cells and epimastigotes. The T. cruzi strains used in this study were analyzed according to their discrete typing unit (DTU) by amplifying and sequencing the 18S rDNA region, the phylogenetic tree classified the strains as TcI. In addition, a model of chronic Chagas infection was developed in C57BL / 6 mice that will be essential for the in vivo evaluation of the therapeutic effects of compounds that are selected in the in vitro phase.La tripanosomiasis americana es una enfermedad prevalente y potencialmente mortal causada por el protozoario Trypanosoma cruzi que representa un grave problema de salud pública en 21 países de Latinoamérica. Los tratamientos disponibles son ineficientes y producen efectos secundarios severos, por lo que surge la necesidad de estudiar nuevas terapias eficientes contra esta enfermedad. En investigaciones preliminares se observó una actividad antiparasitaria de interés en fracciones no purificadas provenientes de plantas de Hamelia sp, a partir de esto, en este trabajo se establecieron modelos de infección celular in vitro y se evaluó el efecto tripanocida de tres compuestos extraídos de Hamelia sp. Para esto se infectaron líneas celulares de mamífero con tripomastigotos y se evaluó la concentración IC50 de tres compuestos hidroalcohólicos (c1-c3) mediante ensayos de citotoxicidad anti-amastigoto. El compuesto c3 fue el más potente contra amastigotos, y el que tuvo mejor selectividad con células y epimastigotos. Las cepas de T. cruzi utilizadas en este estudio se analizaron según su unidad discreta de tipificación (DTU) mediante la amplificación y secuenciación de la región de rADN 18S el árbol filogenético ubicó a las cepas como TcI. Además, se desarrolló un modelo de infección crónica de Chagas en ratones C57BL/6 que será fundamental para la evaluación in vivo de los efectos terapéuticos de compuestos que sean seleccionados en la fase in vitro.