Novel genotype of Ehrlichia canis detected in samples of human blood bank donors in Costa Rica

Abstract

This study focuses on the detection and identification of DNA and antibodies to Ehrlichia spp. in samples of blood bank donors in Costa Rica using molecular and serological techniques. Presence of Ehrlichia canis was determined in 10 (3.6%) out of 280 blood samples using polymerase chain reaction (PCR) targeting the ehrlichial dsb conserved gene. Analysis of the ehrlichial trp36 polymorphic gene in these 10 samples revealed substantial polymorphism among the E. canis genotypes, including divergent tandem repeat sequences. Nucleotide sequences of dsb and trp36 amplicons revealed a novel genotype of E. canis in blood bank donors from Costa Rica. Indirect immunofluorescence assay (IFA) detected antibodies in 35 (35%) of 100 serum samples evaluated. Thirty samples showed low endpoint titers (64–256) to E. canis, whereas five sera yielded high endpoint titers (1024–8192); these five samples were also E. canis-PCR positive. These findings represent the first report of the presence of E. canis in humans in Central America.Este estudio se centra en la detección e identificación de ADN y anticuerpos contra Ehrlichia spp. en muestras de donantes de bancos de sangre en Costa Rica utilizando técnicas moleculares y serológicas. La presencia de Ehrlichia canis se determinó en 10 (3,6%) de 280 muestras de sangre utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) dirigida al gen conservado dhr ehrlichial. El análisis del gen polimórfico ehrlichial trp36 en estas 10 muestras reveló un polimorfismo sustancial entre los genotipos de E. canis, incluidas las secuencias de repetición en tándem divergentes. Las secuencias de nucleótidos de los amplicones dsb y trp36 revelaron un nuevo genotipo de E. canis en donantes de bancos de sangre de Costa Rica. El ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IFA) detectó anticuerpos en 35 (35%) de 100 muestras de suero evaluadas. Treinta muestras mostraron títulos bajos de punto final (64–256) a E. canis, mientras que cinco sueros arrojaron títulos altos de punto final (1024–8192); estas cinco muestras también fueron positivas para E. canis-PCR. Estos hallazgos representan el primer informe de la presencia de E. canis en humanos en América Central.