A Selective Ion HPLC-APCI-MS Method for the Quantification of Pentacyclic Triterpenes in an Anxiolytic Botanical Dietary Supplement for the Animal Health Market

Abstract

A new anti-anxiety dietary supplement was developed for the animal health market, by combining 2 triterpene containing botanicals, Souroubea sympetala (Marcgraviaceae) with Platanus occidentalis (Platanaceae) A validated method for a quality control of the botanical blend was achieved using HPLC-APCIMS. The method resulted in the detection and quantitative determination of betulinic acid (1), and ursolic acid (2) in P. occidentalis and 1, 2, lupeol (3), β-amyrin (4) and α-amyrin (5) in S. sympetala and the finished product ZentrolTM. Detections were at low ng on column for 1 and 2 and in low µg range for 3, 4 and 5 using calibration curves within 10-100 ng (R2 > 0.993). Recovery of spiked samples for all the recoveries observed were > 94%. Inter-day and intraday variations were 0.8-3.5% and 5-10.4%, respectively. These results indicate the suitability of the developed analytical method to detect and quantify triterpenes of raw materials used in the manufacture of natural health productsSe desarrolló un nuevo suplemento dietético contra la ansiedad para el mercado de la salud animal, mediante la combinación de 2 botánicos que contienen triterpenos, Souroubea sympetala (Marcgraviaceae) con Platanus occidentalis (Platanaceae) Se logró un método validado para un control de calidad de la mezcla botánica utilizando HPLC-APCIMS . El método resultó en la detección y determinación cuantitativa de ácido betulínico (1) y ácido ursólico (2) en P. occidentalis y 1, 2, lupeol (3), β-amirina (4) y α-amirina (5) en S. sympetala y el producto terminado ZentrolTM. Las detecciones fueron de ng bajo en la columna para 1 y 2 y en un rango de µg bajo para 3, 4 y 5 utilizando curvas de calibración dentro de 10-100 ng (R2 > 0,993). La recuperación de las muestras enriquecidas para todas las recuperaciones observadas fue > 94 %. Las variaciones interdiarias e intradiarias fueron 0,8-3,5% y 5-10,4%, respectivamente. Estos resultados indican la idoneidad del método analítico desarrollado para detectar y cuantificar los triterpenos de las materias primas utilizadas en la fabricación de productos naturales para la salud.