Pruebas in vitro para determinar la utilización de cepas costarricenses de hongos nematófagos como potenciales controladores biológicos de nemátodos gastrointestinales de ovinos y caprinos

Abstract

Para el aislamiento e identificación de hongos nematófagos depredadores (HND), se tomaron muestras de cincuenta y un fincas distribuidas entre todas las provincias de Costa Rica. La naturaleza de las muestras incluyó: suelos de diferentes sembradíos (papa, tomate, banano, plantas ornamentales, chayote y café), heces de animales (bovinos, ovinos, caprinos y equinos), suelo y hojarasca de bosques y plantas con signos de enfermedad causada por nemátodos. Las muestras se procesaron mediante 3 técnicas diferentes para la extracción de hongos a partir del suelo: espolvoreado en placa, dilución de suelos y cámara húmeda. Veinticuatro cepas de hongos nematófagos fueron aisladas de 19 fincas; el 83.3% de éstos, aislados mediante las técnica de espolvoreado en placa. Los hongos fueron identificados como: Arthrobotrys oligospora (n=13), Candelabrella musiformis (n=9) y por primera vez se reporta el aislamiento de A. conoides (n=1) y A. dactyloides (n=1) en el país. Asimismo, se aislaron 16 cepas de hongos de los géneros Trichoderma (n=13), Beauveria (n=1), Clonostachys (n=1) y Lecanicillium (n=1). Adicionalmente se les midió el pH, el cual varió entre 5.2 hasta 9.9, ubicándose los HND dentro de un rango entre 5.6 a 7.5. Las cepas de HND fueron cultivadas en 4 medios diferentes para la producción de clamidosporas: papa dextrosa agar, harina de maíz, extracto de malta y agar papa-zanahoria. El 95.8% de las cepas aisladas produjeron clamidosporas, principalmente en el medio agar papa-zanahoria. De estas cepas, se escogieron las de mayor producción para ser sometidas a la prueba de digestibilidad in vitro. Un total de 14 hongos fueron sometidos a esta prueba, de los cuales el 42.9% resultó viable; A. conoides y A. dactyloides no sobrevivieron a la prueba de digestibilidad in vitro. Los hongos nematófagos, aislados en este estudio, tienen acción contra los nemátodos gastrointestinales de ovinos y caprinos y son promisorios candidatos para ser utilizados en control biológicos de estos organismos.

For the gathering and identification of predator nematophagous fungi (PNF), samples were collected from fifty one farms distributed along the seven provinces of Costa Rica. The nature of samples included: soil from different crops (potatoes, tomatoes, bananas, ornamental plants, mirlitons and coffee), animal feces (cattle, sheep, goats and horses), soil and fallen leaves from forests and plants with signs of diseases caused by nematodes. Each sample was processed using 3 different techniques for the extraction of fungi from soil: sprinkling technique, soil dilution and humidity chamber. Twenty four strains of nematophagous fungi were founded in 19 farms; 83.3% of the fungi were isolated by sprinkling technique. The fungi identified were: Arthrobotrys oligospora (n=13), Candelabrella musiformis (n=9), and for the first time there is evidence of isolation of A. conoides (n=1) and A. dactyloides (n=1) in the country. Also, 16 strains from Trichoderma (n=13), Beauveria (n=1), Clonostachys (n=1) and Lecanicillium (n=1) were obtained. In addition, pH was measured and it varied from 5.2 to 9.9, placing the PNF inside ranges of 5.6 and 7.5. The PNF strains were cultivated in four different media for the production of chlamydospores: potato dextrose agar, corn meal agar, malt extract and potato carrot agar. From this cultures, 95.8% of the strains formed chlamydospores, mainly in the potato carrot agar. Out of the strains, the ones that produced most of these particular spores were subjected to ruminant artificial gastrointestinal conditions. A total of 14 fungi were tested, out of which 42.9% survived the digestive analysis. Neither A. conoides, nor A. dactyloides were able to grow after the in vitro gastrointestinal test. The PNF isolated in this study have an action against ovine and caprine gastrointestinal nematodes and are candidates to be used as biological control of these organisms.